Ninhydrin wird häufig sowohl für die manuelle als auch automatische Quantifizierung von Aminosäuren verwendet. Hier wurde ein verbesserter und praktischer Ninhydrin-Assay für Aminoacylase-Aktivitätsmessungen unter Verwendung des kommerziellen EZ NinTM-Reagens entwickelt. Alternative Reagenzien aus der Literatur wurden ebenfalls bewertet und verglichen. Die Zugabe von DMSO zum Reagenz verbesserte die Löslichkeit von Ruhemann´s Purpur (RP). Weiterhin konnte die Stabilität von RP unter Verwendung eines basischen, wässrigen Puffers erhöht werden. Ein saures Protokoll zur Quantifizierung von Lysin wurde durch Zugabe von Eisessig entwickelt. Der Assay ermöglicht eine parallele Messung der Proben in einem 96-Well-Format mit Mikrotiterplatten.
Haeger G.; Bongaerts J.; Siegert P., A convenient ninhydrin assay in 96-well format for amino acid-releasing enzymes using an air-stable reagent, Analytical Biochemistry (2022), 654, 114819. doi.org/10.1016/j.ab.2022.114819.